使用说明书
【产品名称】
Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
【货号/规格】
K M 00 4 - A ( 2 4 rxns ) ; K M 00 4 - B ( 96 rxns ); 试用装(6 rxns )
【产品简述】
本试剂盒针对 MGI 高通量测序平台,提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构 建方案,将 片段化、 末端补平和末端加 A 结合到一个步骤,大大缩短了pg电子赏金女王五个夺宝的时间、减少了繁 琐步骤造成的误差, 片段化和 末端修复 后的产物可直接进行 接头连接 , 不需额外 纯化 , 后续操作和#K M 001 Fast DNA Library Prep Kit for MGI 操作相同 。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度,用双链 DNA 荧光染料方法 ( 如 Thermo Qubit Flex Fluorometer) 或 qPCR 绝对定量方法。
【样本类型】
表 1 常用 DNA 推荐投入量
应用 |
样本类型 |
推荐投入量 |
全基因组测序 |
高质量复杂基因组 |
50ng-1μg |
全外显子靶向捕获测序 |
高质量复杂基因组 |
10ng-1μg |
全基因组靶向捕获测序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
全基因组测序 |
微生物基因组 |
1ng-1μg |
推荐使用 TE 或超纯水溶解 DNA 样品,如样品中含有 EDTA ,则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和 。
【储存条件及有效期】
所有试剂均应保存于-20℃, Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出,属正常现象, 应平衡至室温后使用,产品有效期为 12 个月。
【组成成分】
组分 |
24 rxns |
96 rxns |
FEP Buffer |
120 μl |
4 8 0 μl |
FEP Enzyme Mix |
240 μl |
2 × 48 0 μl |
Fast DNA Ligase |
120 μl |
2 × 24 0 μl |
Fast Ligation Buffer |
600 μl |
4×600 μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix |
600 μl |
4×600 μl |
Primer Mix for MGI * |
120 μl |
4 8 0 μl |
Neutralization Buffer |
120 μl |
4 8 0 μl |
*FEP Buffer 为片段化、末端修复的反应 buffer , FEP Enzyme Mix 为片段化、末端修复相关酶混合物。
*若有多个样本,则推荐使用 #K M 002 和 #K M 003 接头引物组合,本试剂盒提供一套引物,引物序列如下:
5 ’ -TGTGAGCCAAGGAGTTG-3 ’
5 ’ -GAACGACATGGCTACGA-3 ’
备注:分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads 。